病毒采样管厂家整理新冠病毒的检测步骤

具体操作如下:

一、病毒采样:取病人唾液或者鼻咽拭子于病毒采样管保存

二、核酸提取:提取病人唾液或者鼻咽拭子样本里的遗传物质，如果病人携带病毒，则样本里就会有该病毒的遗传物质RNA，使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于一20℃保存，RNA和需长期保存的DNA应置于一70℃或液氮保存。

三、逆转录合成cDNA:进行提取液中RNA的逆转录，把RNA逆转录成cDNA，逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中，在规定的温度和时间下进行逆转录反应。建议使用商品化RT-PCR一步法试剂进行一轮扩增反应。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT,缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中，在规定的温度和时间下进行逆转录反应。使用商品化RT-PCR一步法试剂进行一轮扩增反应。

四、PCR扩增反应(使用二次扩增的套式PCR扩增方法):用病毒cDNA的特异性引物进行PCR扩增PCR反应需使用引物、dNTPs. DNA聚合酶(如Taq酶等)、缓冲液、和适量无RNA/DNA酶超纯水、以及模板(DNA或cDNA )。在扩增仪中，按照设定的程序进行扩增。使用二次扩增的套式PCR扩增方法。

五、结果分析判定:

若有扩增出病毒的DNA条带，则判定病人体内有该病毒，若没有扩增出DNA条带，则判定病所取样本无该病毒。